- 李慧珍;朱霞;刘丹;马明男;段晓宇;高晓梅;李玉婷;马天仲;
目的 探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者新鲜胚胎移植中超生理水平的雌二醇(E_2)对围产期结局的影响。方法 回顾性分析2013年2月至2021年3月期间在广东医科大学附属医院生殖中心行新鲜周期IVF-ET治疗患者的临床资料，共316个周期。根据病因分为PCOS组(n=104)和对照组(n=212),再以HCG扳机日血清E_2水平3 000 pg/ml(11 010 pmol/L)为界进一步分为PCOS组E_2<3 000 pg/ml者(A组，n=72)、PCOS组E_2≥3 000 pg/ml者(B组，n=32)、对照组E_2<3 000 pg/ml者(C组，n=148)、对照组E_2≥3 000 pg/ml者(D组，n=64)。比较各组患者的一般资料、实验室指标及妊娠结局，对比分析组间围产期结局情况及其相关因素。结果 各组间新鲜胚胎移植周期中移植胚胎类型、临床妊娠率、总流产率、早期流产率比较均无统计学差异(P>0.05);B组中重度卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率及晚期流产率显著高于A、C组，D组中重度OHSS发生率显著高于C组(P<0.05)。各组间临床分娩周期的分娩孕周、分娩方式、新生儿性别、新生儿体重等比较均无统计学差异(P>0.05);各组间围产期母婴并发症发生情况比较亦无统计学差异(P>0.05)。结论 PCOS患者中，HCG日E_2水平对新鲜IVF-ET周期的母婴围产期结局没有显著影响，但HCG日高水平E_2可能增加PCOS患者新鲜胚胎移植周期的晚期流产率；HCG日E_2水平的升高可能增高OHSS的发生率。
2022年11期 v.31 1473-1480页 [查看摘要][在线阅读][下载 202K] [下载次数：273 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1 ] - 李晓艳;许娟娟;伏海燕;王慧;吴蓉花;林莹;黄梦婷;黄旋;陈莉;
目的 探讨不同年龄女性D3卵裂期胚胎细胞数对囊胚发育潜能的影响，为临床优选胚胎提供参考。方法 回顾性分析行囊胚培养的29 314枚D3卵裂期胚胎情况，按照女方年龄分为<35岁组和≥35岁组，再按照卵裂期胚胎细胞数分为4细胞～11~+细胞和融合期胚胎9个亚组，比较不同年龄组中不同细胞数亚组的囊胚形成率。行单囊胚冻融移植的共2 402个周期，其中<35岁组和≥35岁组中又根据囊胚来源的D3胚胎细胞数分为4～6细胞、7～9细胞和≥10细胞+融合期3个亚组，比较不同年龄不同细胞数胚胎来源的囊胚冻融移植临床结局。同时分析1 069个行胚胎植入前非整倍体检测(PGT-A)囊胚中<35岁组和≥35岁组4～6细胞、7～9细胞和≥10细胞+融合期3个亚组的整倍体率情况。结果 (1)<35岁组和≥35岁组中，8细胞亚组发育成囊胚的潜能最高，融合期胚胎次之，而6细胞以下亚组明显劣于其他细胞数目亚组(P<0.05)。(2)<35岁组中，各细胞数D3胚胎发育潜能层次明显，按照可利用囊胚形成率从高到低依次排序为：8细胞>融合期>11~+细胞=9细胞>10细胞=7细胞>6细胞>5细胞=4细胞；≥35岁组中按上述排序为：8细胞=融合期>9细胞=7细胞=11~+细胞=10细胞>6细胞=4细胞>5细胞。(3)<35岁组的临床妊娠率、活产率和整倍体率显著高于≥35岁组(P<0.001)。<35岁组中，4～6细胞亚组冻融单囊胚移植的临床妊娠率和活产率显著低于7～9细胞和≥10细胞+融合期亚组(P<0.05);≥35岁组中各细胞数亚组的临床妊娠率、活产率无显著性差异(P>0.05)。(4)<35岁组和≥35岁组中，各细胞数D3胚胎来源的囊胚整倍体率无显著性差异(P>0.05)。结论 不同年龄女性D3卵裂期胚胎细胞数与囊胚形成呈现不同的发育规律。<35岁组中，各细胞数卵裂期胚胎的囊胚发育潜能层次明显；4～6细胞D3胚胎来源的囊胚行冻融单囊胚移植的妊娠结局低于其他细胞数组。≥35岁组中，冻融单囊胚移植的妊娠结局不受囊胚来源的D3胚胎细胞数影响，只要有囊胚形成则能保持较满意的妊娠率。
2022年11期 v.31 1481-1487页 [查看摘要][在线阅读][下载 184K] [下载次数：348 ] |[引用频次：9 ] |[阅读次数：2 ] - 赵海静;袁萍;赵珺;冀晓慧;张清学;王文军;
目的 分析常规IVF后固定时间原核评估中零原核(0PN)来源胚胎的发育潜能及其染色体整倍体率。方法 回顾性分析2019年10月至2020年9月于本中心行常规IVF治疗的20对不孕不育夫妇的临床资料。共纳入183枚卵母细胞，剔除14枚0PN卵母细胞(处于未受精状态)后，根据原核评估以及细胞分裂情况分为两组：2个原核(2PN)来源胚胎为2PN胚胎组(n=116),0PN来源胚胎为0PN胚胎组(n=53),比较两组患者的胚胎发育情况；同时，为了分析0PN来源胚胎的染色体是否正常，选取0PN来源囊胚为0PN囊胚组(n=42),选取同一时期的植入前遗传学检测-单基因病(PGT-M)周期中2PN来源囊胚为2PN囊胚组(n=251),比较两组患者的染色体整倍体率。结果 0PN胚胎组Day 2(D2)卵裂球数[(5.74±1.40)个vs.(4.32±1.01)个]、D3卵裂球数[(10.15±2.29)个vs.(7.95±1.97)个]、囊胚形成率(86.8%vs. 60.3%)、可利用囊胚率(91.3%vs. 66.0%)均显著高于2PN胚胎组(P<0.05);0PN胚胎组的优质囊胚率(47.8%)略高于2PN胚胎组(31.9%),但差异无统计学意义(P>0.05)。0PN囊胚组的染色体整倍体率(76.2%)略高于2PN囊胚组(75.7%),但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 在常规IVF中，使用固定时间原核评估方法获得的0PN来源胚胎具有较高的发育潜能，其染色体整倍体率也略高于同期PGT-M-2PN来源囊胚；提示大部分0PN来源胚胎由于固定时间原核评估而错过了原核观察，实际上可能源自于正常受精卵，因此其临床应用价值应结合PGT进行重新评估。
2022年11期 v.31 1488-1493页 [查看摘要][在线阅读][下载 165K] [下载次数：160 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：2 ] - 赵小利;薛侠;师娟子;李明昭;
目的 探讨多精受精(≥3PN)的发生对供精IVF(IVF-D)周期胚胎发育和临床结局的影响。方法 回顾性分析2014年1月至2020年12月在我院行IVF-D治疗的1 526例患者(共1 526个IVF-D周期)的临床资料。根据多精受精(≥3PN)率不同分为3组：多精受精率0%的为对照组(n=854),0%<多精受精率≤20%的为低频多精组(n=483),多精受精率>20%的为高频多精组(n=189),比较各组患者的基本资料、胚胎发育情况和妊娠结局。结果 各组间年龄、体质量指数(BMI)、不孕年限、基础FSH(bFSH)及促性腺激素(Gn)天数比较均无显著性差异(P>0.05);对照组的获卵数[(9.51±4.43)枚]显著低于低频多精组[(12.39±3.86)枚](P<0.05)。与高频多精组比较，对照组和低频多精组的正常受精率显著升高(65.69%、65.20%vs. 56.91%,P<0.05),而可用胚胎率显著降低(85.24%、85.75%vs. 88.63%,P<0.05);各组间卵裂率、优胚率及囊胚形成率比较均无显著性差异(P>0.05)。各组间移植日内膜厚度、移植胚胎数、单胚胎移植率和囊胚移植率比较均无显著性差异(P>0.05);对照组和低频多精组的种植率、临床妊娠率、多胎率、持续妊娠率及活产率略高于高频多精组，流产率和异位妊娠率略低于高频多精组，但差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 常规IVF-D过程中，多精受精(≥3PN)的发生不影响胚胎的发育，但可能降低活产率。
2022年11期 v.31 1494-1499页 [查看摘要][在线阅读][下载 162K] [下载次数：206 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：2 ] - 程立立;刘少华;刘珊;许鹏宇;李冬秀;刘秀萍;刘松娜;齐丽丽;
目的 探讨对于胚胎反复种植失败(RIF)患者，宫腔灌注不同物质对冻融胚胎移植(FET)周期妊娠结局的影响。方法 回顾性分析2018年5月至2021年10月于中国人民解放军联勤保障部队第九八○医院生殖中心接受冻融胚胎移植(FET)治疗并行宫腔灌注的120例RIF患者的临床资料。根据宫腔灌注药物不同分为3组：宫腔灌注HCG的HCG组(44例),宫腔灌注粒细胞集落刺激因子(G-CSF)的G-CSF组(42例),宫腔灌注G-CSF+地塞米松磷酸钠注射液(DexSPI)的G-CSF+DexSPI组(34例);选择同期行激素替代周期准备内膜、仅行FET(未行宫腔灌注)的36例患者为对照组。比较各组患者的一般情况、胚胎移植和内膜情况及妊娠结局。结果 4组患者间平均年龄、不孕年限、体质量指数(BMI)、基础卵泡刺激素(bFSH)、基础黄体生成素(bLH)及基础雌二醇(bE_2)水平比较均无显著性差异(P>0.05)。4组患者间既往移植失败周期数、移植失败周期优胚数、本次移植胚胎数、优胚数、转化日内膜厚度及胚胎移植日内膜厚度比较均无显著性差异(P>0.05)。HCG组、G-CSF组及G-CSF+DexSPI组患者的胚胎着床率、临床妊娠率均显著高于对照组(P<0.05),而3组患者间比较均无显著性差异(P>0.05);4组患者间早期流产率、异位妊娠率比较均无显著性差异(P>0.05)。结论 对于RIF患者，FET前行宫腔灌注HCG、G-CSF或G-CSF+DexSPI,均可以改善子宫内膜容受性，提高患者的胚胎着床率及临床妊娠率。
2022年11期 v.31 1500-1505页 [查看摘要][在线阅读][下载 168K] [下载次数：493 ] |[引用频次：9 ] |[阅读次数：1 ] - 王雪金;张宏展;胡晓东;郭珊珊;徐洁敏;游静;莫美兰;
目的 探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中采用促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)单扳机后发生不同反应对胚胎结局的影响。方法 回顾性分析2016年12月至2021年10月于本中心首次行IVF-ET、采用GnRH-a单扳机的1 460例患者的临床资料。根据GnRH-a单扳机后(8～13 h)血LH和孕酮值分为4组：LH≥15 U/L且孕酮≥9.54 nmol/L为正常反应组(n=1 402),LH<15 U/L且孕酮≥9.54 nmol/L为次优反应1组(n=21),LH≥15 U/L且孕酮<9.54 nmol/L为次优反应2组(n=34),LH<15 U/L且孕酮<9.54 nmol/L为低反应组(n=3)。比较各组患者的一般资料、促排卵结局及胚胎发育情况；采用多元线性回归模型探究GnRH-a单扳机后不同反应与胚胎结局的关系。结果 正常反应组的体质量指数(BMI)显著低于次优反应1组与次优反应2组(P<0.05),次优反应1组的基础LH显著低于正常反应组与次优反应2组(P<0.05),次优反应2组扳机日雌二醇(E_2)、孕酮、≥14 mm卵泡数均显著低于正常反应组和次优反应1组(P<0.05)。次优反应2组的获卵数显著低于正常反应组和次优反应1组(P<0.05),正常反应组的受精数显著高于次优反应1组和次优反应2组(P<0.05)。多元线性回归模型结果显示，与正常反应组相比较，次优反应组和低反应组的获卵率均显著降低(P<0.05),低反应组的优胚率显著降低(P<0.05)。结论 GnRH-a单扳机后出现低反应或次优反应者可能影响体IVF-ET患者的胚胎结局。
2022年11期 v.31 1506-1512页 [查看摘要][在线阅读][下载 189K] [下载次数：179 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：1 ] - 杨婷;苟文婕;王薇;赵翠;陈学良;马晓玲;王雅琦;张学红;
目的 探讨传统针刺疗法用于波塞冬卵巢低反应(POR)第3分组患者IVF-ET辅助治疗的疗效，观察传统针刺治疗对POR患者卵泡液中卵子发育相关因子和炎症因子表达、颗粒细胞线粒体DNA(mtDNA)拷贝数的影响。方法 选取2017年10月至2020年10月于我中心行IVF-ET治疗、符合波塞冬POR第3分组的109名患者为研究对象，随机分为针刺组(n=50)与对照组(n=59),针刺组取卵前辅助传统针刺治疗3个周期。比较两组患者的基础资料、促排卵结局及累计活产率；测定两组患者卵泡液中β-内啡肽(β-EP)、间隙连接蛋白43(Cx43)、骨形态发生蛋白-4(BMP-4)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、环氧合酶-2(COX-2)水平；检测颗粒细胞mtDNA拷贝数。结果 两组患者的基础资料无显著性差异(P>0.05)。针刺组和对照组的获卵数[(3.89±2.35) vs.(4.31±0.87)]、2PN数[(2.71±1.71) vs.(1.69±1.43)]、优质胚胎率(84.21%vs. 86.36%)、累计活产率(52.00%vs. 50.84%)均无统计学差异(P>0.05);针刺组的MⅡ卵率显著高于对照组(86.72%vs. 71.76%)(P<0.05)。两组患者间卵泡液中β-EP、BMP-4、Cx43水平均无显著差异(P>0.05),针刺组患者卵泡液中ICAM-1、COX-2水平显著低于对照组[分别为(389.81±61.68)IU/ml vs.(471.56±93.60) IU/ml,(21.55±4.78)IU/ml vs.(29.42±6.53)IU/ml,P<0.05]。两组间颗粒细胞mtDNA拷贝数比较无统计学差异(P>0.05)。结论 传统针刺治疗3个周期可以提高波塞冬POR第3分组患者IVF-ET治疗中的MⅡ卵率，但不能提高累计活产率；针刺治疗可以降低卵泡液中部分炎症因子水平，可能一定程度上影响卵泡发育微环境。
2022年11期 v.31 1513-1519页 [查看摘要][在线阅读][下载 181K] [下载次数：330 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：1 ] - 劳艳萍;姚妮;唐秀法;公方强;黄华;牛向丽;
目的 分析体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)实验室因素对子代出生性别比(SRB)的影响。方法 回顾性分析2010年1月至2019年12月在我院行IVF/ICSI-ET治疗并成功妊娠分娩患者(共19 844个周期)的SRB情况。辅助生殖技术(ART)的主要实验室因素包括受精方式、移植胚胎类型、移植胚胎时期和移植胚胎数目等，故根据不同的受精方式分为IVF组(n=14 626)和ICSI组(n=4 908);根据不同移植胚胎时期分为卵裂胚组(n=8 778)和囊胚组(n=11 066);根据不同移植胚胎类型分为新鲜胚胎组(n=11 533)和解冻胚胎组(n=8 311);根据不同移植胚胎个数分为单胚胎组(n=3 871)和双胚胎组(n=14 483)。分别观察以上4个实验室因素对SRB的影响；采用单因素及多因素Logistic回归分析各因素与SRB的相关性；并分析2010～2019年我院总SRB的变化趋势。结果 我院2010年1月至2019年12月行IVF/ICSI-ET共出生新生儿24 661名，其中男婴13 532名(54.9%),女婴11 129名(45.1%),该时期ART的SRB(121.6∶100)高于文献报道的自然受孕SRB(106～110.2∶100)。不同实验室因素的分组中，IVF组的SRB(126.2∶100)显著高于ICSI组(107.5∶100)(P<0.05);囊胚组的SRB(129.2∶100)显著高于卵裂胚组(112.8∶100)(P<0.05);解冻胚胎组的SRB略高于新鲜胚胎组，但差异无统计学意义(P>0.05);单胚胎组的SRB(130.0∶100)显著高于双胚胎组(120.5∶100)(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示，受精方式[OR=0.854,95%CI(0.803,0.908)]和移植胚胎时期[OR=1.192,95%CI(1.114,1.276)]是SRB的独立影响因素(P<0.001)。2010—2019年我院总SRB没有明显逐年升高或者降低的趋势；在相同年份中，卵裂胚的SRB相对于囊胚有降低趋势，ICSI的SRB相对于IVF有降低趋势。结论 ART的SRB高于自然受孕，IVF受精的SRB显著高于ICSI,囊胚移植的SRB显著高于卵裂期胚胎移植。
2022年11期 v.31 1520-1527页 [查看摘要][在线阅读][下载 199K] [下载次数：237 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：1 ] - 张丽欣;张春晓;
目的 探讨多囊卵巢综合征(PCOS)不孕症患者子宫内膜组织中微小RNA-21(miR-21)、miR-155的表达及其与内膜容受性的关系。方法 选取2019年5月至2021年8月在本院生殖医学科就诊的148例PCOS不孕症患者为PCOS组，另选取同期在本院体检并明确因男性因素不孕的135例女性为对照组。又根据子宫内膜容受性检测结果将PCOS组分为容受性良好组(46例)和容受性不良组(102例)。进行子宫内膜组织取材，采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测子宫内膜组织中miR-21、miR-155的表达水平。比较各组的一般资料及miR-21、miR-155表达水平，采用多因素Logistic回归分析PCOS不孕症患者子宫内膜容受性的影响因素。结果 PCOS组和对照组的一般资料无显著性差异(P>0.05);PCOS组miR-21、miR-155表达水平均显著高于对照组(P均<0.05)。子宫内膜容受性不良组miR-21、miR-155表达水平均显著高于容受性良好组(P均<0.05);容受性不良组的年龄、体质量指数(BMI)、不孕年限、PCOS病程及不孕症类型与容受性良好组比较均无显著性差异(P均>0.05);容受性不良组的搏动指数(PI)、阻力指数(RI)显著高于容受性良好组(P<0.05),子宫内膜厚度(Em)及孕酮(P)、雌二醇(E_2)水平均显著低于容受性良好组(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示，miR-21、miR-155表达水平和PI、RI、Em、P及E_2水平均是PCOS不孕症患者子宫内膜容受性的影响因素(P均<0.05)。结论 PCOS不孕症患者子宫内膜组织miR-21、miR-155表达水平均显著高于对照人群，二者与PI、RI、Em及P、E_2水平均是子宫内膜容受性的显著影响因素。
2022年11期 v.31 1528-1533页 [查看摘要][在线阅读][下载 168K] [下载次数：258 ] |[引用频次：8 ] |[阅读次数：1 ] - 邹玥;刘颖;
目的 探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清微小RNA-320a(miR-320a)、miR-145表达水平及其与雌、孕激素的关系。方法 采用前瞻性研究，选取2019年5月至2021年7月于本院就诊的92例PCOS患者作为PCOS组，另招募同期健康体检的90例育龄期女性作为对照组。采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测并比较两组患者血清miR-320a和miR-145表达水平，采用电化学发光法检测并比较两组患者血清E_2和孕酮水平；采用Pearson相关性分析探讨PCOS患者血清miR-320a、miR-145表达水平与雌孕激素的关系。结果 电化学发光检测结果显示，PCOS组血清E_2和孕酮水平显著低于对照组(P<0.05);Real-time PCR检测结果显示，PCOS组血清miR-320a和miR-145表达水平均显著低于对照组(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示，PCOS组血清miR-320a和miR-145表达水平与E_2和孕酮水平均呈显著正相关(P<0.05)。结论 PCOS患者血清miR-320a和miR-145表达水平显著低于健康育龄期女性，且其表达水平与血清E_2、孕酮水平呈显著正相关，提示临床干预中可通过调控miR-320a、miR-145的表达来调节PCOS患者雌孕激素水平。
2022年11期 v.31 1534-1538页 [查看摘要][在线阅读][下载 234K] [下载次数：114 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：1 ] - 谷智越;史精华;张晶;吴瑜诗;张晨昱;鄢海蓝;冷金花;李晓燕;
目的 探讨子宫膀胱瘘(VUF)发生的病因、诊断和治疗方法。方法 回顾性分析北京协和医院2000年1月至2021年7月收治的6例VUF患者的临床资料，并通过检索近20年的中英文文献筛选出276例病例，对这282例患者的临床资料进行汇总分析，同时进行文献复习。结果 282例患者中，VUF发生最主要的病因是子宫下段剖宫产，占87.23%;其最常见、最具特征的临床症状是周期性血尿，占61.61%。VUF常用的影像学诊断方法包括超声、膀胱镜、磁共振成像(MRI)、宫腔造影、膀胱造影和CT尿路造影(CTU)等，其中MRI对发现VUF有独特的诊断价值。97.15%的VUF患者通过手术修补瘘口，术后愈合良好。结论 VUF常为医源性疾病，多继发于剖宫产术后，术中仔细解剖有助于预防VUF发生。MRI是识别异常窦道的有效手段，单纯膀胱镜检查存在误诊或漏诊的风险。手术修补是根本的治疗方式，整体预后较好。
2022年11期 v.31 1539-1544页 [查看摘要][在线阅读][下载 171K] [下载次数：149 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1 ] - 杨元菁;施晓鋆;王聪;
目的 探讨重组生长激素(r-GH)预处理对卵巢低反应(POR)患者促排卵结局及子宫内膜容受性的影响，为临床上r-GH在POR患者中的应用提供参考。方法 选取2020年10月至2021年12月就诊于贵阳市妇幼保健院生殖中心的75例POR患者为研究对象，随机分为对照组(25例)及预处理组(给予r-GH预处理，50例),比较两组患者的一般资料、促排卵和胚胎发育指标，以及预处理组r-GH预处理前后的自身对照情况。又将75例患者按照年龄不同分为<35岁组及≥35岁组，比较不同年龄组中对照组和预处理组的促排卵结局及预处理组的自身对照情况。此外，对预处理组中的10例患者在预处理前后分别取样子宫内膜组织，采用免疫组化法和qRT-PCR法检测同源框基因A10(HOXA10)的蛋白及mRNA表达水平。结果 对照组和预处理组的年龄、不孕年限、体质量指数(BMI)、基础性激素水平比较均无显著性差异(P>0.05)。两组患者的Gn天数、基础窦卵泡计数(AFC)、HCG日E_2及内膜厚度、2PN率及优质胚胎率比较均无显著性差异(P>0.05);预处理组Gn总量显著低于对照组，获卵数及MⅡ卵数显著高于对照组(P均<0.05)。预处理组的自身对照比较中，进行预处理的本周期中Gn总量、Gn天数显著低于未行预处理的上一周期，获卵数、MⅡ卵数及优质胚胎率显著高于上一周期(P均<0.05)。<35岁患者中对照组和预处理组的促排卵及胚胎发育指标均无显著性差异(P>0.05);预处理组的自身对照比较中，本周期的Gn天数显著低于上一周期，获卵数及MⅡ卵数显著高于上一周期(P均<0.05)。≥35岁患者中，预处理组的Gn天数显著低于对照组，优质胚胎率显著高于对照组(P<0.05);预处理组的自身对照比较中，本周期的Gn天数显著低于上一周期，获卵数、MⅡ卵数及优质胚胎率显著高于上一周期(P均<0.05)。r-GH预处理后子宫内膜中HOXA10蛋白及mRNA表达显著高于预处理前(P<0.05)。结论 在促排卵周期前对POR患者进行r-GH预处理可提高卵巢反应性，改善子宫内膜容受性及胚胎质量；且r-GH预处理可能对年龄≥35岁的POR患者益处更大。
2022年11期 v.31 1545-1553页 [查看摘要][在线阅读][下载 468K] [下载次数：316 ] |[引用频次：8 ] |[阅读次数：2 ] - 王丽;赵杰;陈秀娟;杜琛;刘芳;何江峰;梅步俊;
目的 筛选人卵丘颗粒细胞中影响卵母细胞多精受精的差异表达基因。方法 筛选3名因输卵管因素导致继发不孕的患者为研究对象，长方案促排卵后，在授精前10 min,对每个卵母细胞外围的卵丘颗粒细胞进行切割，分装无菌管保存。卵冠丘复合体(OCCC)进行微滴授精，受精后17～18 h,观察受精情况；并根据卵母细胞受精情况分为多精受精组和正常受精组，收集两组对应的颗粒细胞。提取颗粒细胞总mRNA,构建cDNA文库并进行测序，将得到的数据进行生物信息学分析，筛选出差异表达基因，并将差异表达基因进行基因本体论(GO)分析和京都基因和基因组数据库(KEGG)分析。结果 与正常受精组比较，多精受精组中显著上调的基因有106个，显著下调的基因有33个。上调的基因主要涉及P53信号通路、PI3K-AKT信号通路、肌动蛋白细胞骨架信号通路和HIPPO信号通路，其中基因BMP2、SESN3、CDK6、GRLF1(ARHGAP35)与多精受精有关。结论 与正常受精比较，多精受精时颗粒细胞存在差异表达的基因，对这些基因的进一步了解可能为后续开展异常受精的影响因素分析提供一定参考。
2022年11期 v.31 1554-1560页 [查看摘要][在线阅读][下载 389K] [下载次数：215 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1 ]
- 邹薇;蒋梦芬;马天仲;
目的 分析辅助生殖技术(ART)与妊娠并发症及子代不良结局的相关性，探讨ART技术对胎盘生长因子(PIGF)和父系表达基因3(PEG3)的影响。方法 收集2021年9—12月在广东医科大学顺德妇女儿童医院产科分娩的产妇资料，根据妊娠方式分为ART组(经ART获得妊娠，n=113)和自然妊娠组(n=153)。比较两组产妇的基本资料、妊娠期并发症及子代不良结局。分别收集两组的胎盘组织各18例，标记为自然妊娠组(A1-A18)和ART组(B1-B18),HE染色观察两组胎盘组织的形态结构，qRT-PCR检测PIGF和PEG3的mRNA表达水平，Western blot及免疫组化检测PIGF和PEG3的蛋白表达水平及定位，统计分析两组间的差异。结果 与自然妊娠组相比，ART组的产妇年龄、体质量指数(BMI)、剖宫产比例显著上升，产次显著下降(P均<0.05),妊娠期高血压和妊娠期糖尿病(GDM)的发生率显著升高(P<0.05)。ART组的新生儿早产及低出生体重儿比率显著高于自然妊娠组(P<0.05)。qRT-PCR结果显示，ART组产妇胎盘组织中PIGF的mRNA表达水平显著低于自然妊娠组(P<0.05),而PEG3的mRNA表达水平在两组间无显著性差异(P>0.05)。Western blot结果显示，ART组胎盘组织中的PEG3蛋白灰度值显著低于自然妊娠组(P<0.05),而PIGF蛋白的灰度值有低于自然妊娠组的趋势，但差异尚无统计学意义(P>0.05)。HE染色结果显示，ART组和自然妊娠组胎盘光镜下结构大体正常；免疫组化结果显示，PEG3蛋白主要表达于胎盘合体滋养细胞的细胞膜中，PIGF蛋白主要表达于胎盘的合体滋养细胞的细胞膜和细胞质中。结论 通过ART助孕的产妇，孕期发生妊娠期高血压和GDM的几率增加，且新生儿不良结局发生风险增加；ART助孕影响胎盘组织中PIGF和PEG3 mRNA及蛋白的表达，但是不影响胎盘结构，ART助孕对胎盘的影响还需进一步研究。
2022年11期 v.31 1561-1567页 [查看摘要][在线阅读][下载 312K] [下载次数：115 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1 ] - 吴淑娟;覃晓琳;陈娇;杨菁;
目的 分析Rho相关激酶(ROCK1)对巨噬细胞M1极化的影响。方法 巨噬细胞系THP1细胞接种于6孔板中，以每孔100 ng/ml终浓度的佛波酯(PMA)诱导48 h细胞贴壁，分化为M0巨噬细胞。向M0细胞的培养基中添加干扰素-γ(IFN-γ)20 ng/ml、脂多糖(LPS)100 ng/ml继续诱导48 h设为M1组；向M0细胞的培养基中添加IFN-γ20 ng/ml、LPS 100 ng/ml、ROCK1抑制剂Y27632 1μmol/L继续诱导48 h设为M1+Y27632组；添加等量的PBS 48 h设为对照M0组。观察THP1来源巨噬细胞向经典激活的巨噬细胞(M1)极化过程中的形态改变；实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化性蛋白1(MCP1)、CXC趋化因子配体16(CXCL16)和ROCK1 mRNA表达水平；Western blot检测ROCK1蛋白表达量；流式细胞术检测各组细胞表面M1型标志物CD86的表达及抑制ROCK1后各组细胞活性氧(ROS)的水平。结果 THP1巨噬细胞向M1极化过程中，M1组细胞比对照M0组伸出更多伪足。与对照M0组相比，M1组细胞IL-6和CXCL16的mRNA水平均显著增加(P<0.05);M1组细胞中ROCK1的蛋白和mRNA水平均显著增加(P<0.05)。检测添加ROCK1抑制剂Y27632后各组中促炎因子表达水平的变化，结果显示：与对照M0组相比，M1组中促炎因子IL-6、TNF-α、MCP-1、CXCL16的mRNA表达水平显著升高(P<0.05);M1+Y27632组IL-6、TNF-α、MCP-1、CXCL16的mRNA表达水平显著低于M1组(P<0.01)。流式细胞术检测结果显示，M1组中CD86阳性细胞的比例显著高于对照M0组(P<0.01),M1+Y27632组CD86阳性细胞的比例显著低于M1组(P<0.05);M1组细胞内的ROS水平较对照M0组显著上升(P<0.01),M1+Y27632组ROS的水平显著低于M1组(P<0.01)。结论 抑制ROCK1可能通过ROS抑制THP1巨噬细胞向M1的极化。
2022年11期 v.31 1568-1573页 [查看摘要][在线阅读][下载 315K] [下载次数：1028 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：2 ] - 崔静静;刘芳;张燕;曹平;马燕;
目的 观察丹参酮ⅡA对着床障碍模型大鼠子宫炎症微环境和子宫内膜容受性的影响，并探讨其潜在的作用机制。方法 选择动情周期规律的健康6～7周龄SPF级SD大鼠共40只为研究对象，雌雄比为3∶1,进行雌雄鼠合笼后将妊娠成功的20只大鼠按照随机数字表随机分为4组：正常对照组、模型组、丹参酮ⅡA低剂量组(10 mg·kg~(-1)·d~(-1))、丹参酮ⅡA高剂量组(20 mg·kg~(-1)·d~(-1)),每组5只。妊娠第1天，丹参酮ⅡA低剂量组、高剂量组大鼠分别进行相应剂量的丹参酮ⅡA灌胃，连续7 d;正常对照组和模型组给予等体积生理盐水。除正常对照组外，其余各组在妊娠第4天行颈背部皮下注射米非司酮(5 mg/kg),构建胚胎着床障碍模型。各组大鼠均于妊娠第8天行颈椎脱臼法处死，取材后，采用扫描电镜观察子宫内膜胞饮突数量；Western blot检测子宫内膜植入位点组织中白血病抑制因子(LIF)、血管紧张素2(Ang-2)、血管内皮生长因子(VEGF)、Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核因子-κB p65磷酸化蛋白[NF-κB(p-p65)]表达情况；免疫组化法检测大鼠子宫内膜植入位点组织中转化生长因子-β1 (TGF-β1)及p65蛋白表达水平；ELISA检测子宫内膜植入位点组织脂氧素A4(LXA4)、白介素(IL)-1α、IL-1β、IL-6、IL-4表达水平。结果 扫描电镜下观察发现，模型组大鼠子宫内膜表面偶见较少数量的胞饮突，而丹参酮ⅡA低剂量组、高剂量组的子宫内膜胞饮突数量明显增加。Western blot检测显示，模型组中LIF、Ang-2和VEGF表达均显著低于正常对照组(P<0.01);丹参酮ⅡA低剂量组和高剂量组LIF、Ang-2和VEGF表达均显著高于模型组(P<0.05);模型组中TLR4、MyD88、p-p65表达水平均显著高于正常对照组(P<0.01);丹参酮ⅡA低剂量组和高剂量组中TLR4、MyD88、p-p65表达水平均显著低于模型组(P均<0.05)。免疫组化染色法显示，模型组中TGF-β1表达水平显著高于正常对照组(P<0.01);丹参酮ⅡA低剂量组和高剂量组中的TGF-β1表达水平均显著低于模型组(P<0.05)。ELISA检测结果显示，与正常对照组相比，模型组中LXA4、IL-1α、IL-1β和IL-6水平显著增加(P<0.01),IL-4水平显著降低(P<0.05);与模型组相比，丹参酮ⅡA低剂量组和高剂量组中LXA4、IL-1α、IL-1β和IL-6水平均显著降低(P均<0.05),IL-4水平显著升高(P<0.05)。结论 丹参酮ⅡA可能通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路进一步改善子宫炎性微环境，进而改善着床障碍模型大鼠着床窗期子宫内膜容受性。
2022年11期 v.31 1574-1582页 [查看摘要][在线阅读][下载 650K] [下载次数：382 ] |[引用频次：17 ] |[阅读次数：1 ] - 孙亚婷;贾瑶;朱爱珍;
目的 探讨小鼠卵母细胞体内成熟过程中细胞周期蛋白依赖性激酶-1(CDK1)蛋白和CDK1 mRNA表达的动态变化。方法 将6～8周龄SPF级ICR雌性小鼠68只随机分为4组，根据获取卵母细胞的时期分为GV组、GVBD组、MⅠ组和MⅡ组，每组17只。腹腔注射10 U孕马血清促性腺激素(PMSG)48 h后，颈椎脱臼处死法处死小鼠，获取GV期卵母细胞；注射PMSG 48 h后注射10 U人绒毛膜促性腺激素(HCG),分别于注射HCG后4 h、8 h和12 h后获取GVBD、MⅠ和MⅡ期卵母细胞。Western blot检测各阶段卵母细胞CDK1蛋白的表达，实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各阶段卵母细胞中CDK1 mRNA的表达，并采用Spearman相关分析检验CDK1 mRNA和蛋白表达的相关性。结果 Western blot结果显示，CDK1蛋白在GV、GVBD、MⅠ和MⅡ期卵母细胞均有表达，且随着卵母细胞的体内成熟，CDK1蛋白表达量持续增加(P<0.05)。qRT-PCR结果显示，CDK1 mRNA在GV、GVBD、MⅠ和MⅡ期卵母细胞均有表达；与GV期比较，GVBD期和MⅠ期CDK1 mRNA表达水平均显著下调(P<0.05),而MⅡ期CDK1 mRNA表达水平显著上调(P<0.05)。Spearman相关分析显示，卵母细胞体内成熟过程中CDK1蛋白与CDK1 mRNA表达的相关性较差(R=0.200)。结论 卵母细胞体内成熟过程中CDK1蛋白的增加并不完全是由转录水平的变化引起的，其他一些机制可能在转录后水平上影响CDK1蛋白的翻译。本研究为进一步深入探讨卵母细胞成熟的分子机制奠定了一定基础。
2022年11期 v.31 1583-1587页 [查看摘要][在线阅读][下载 203K] [下载次数：321 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1 ]